ELSA試劑盒常用方法的優(yōu)勢劣勢進行對比

       我們知道，ELSA試劑盒可分為多種類型測定，是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或的分析技術。我公司技術部將名種ELSA試劑盒常用方法的優(yōu)勢劣勢進行對比。

一、直接法

將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的抗體，即可測定抗原總量，此抗體的特異性非常重要。

1.優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。

2.劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。

二、間接法:

此測定方法與直接法類似，差別在于抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識抗體來測定抗原量。

1.優(yōu)勢:二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的抗體則能保留它多的反應性,。

2.劣勢:交互反應發(fā)生的機率較高。

三、雙抗體夾心法:

被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其中一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記，再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

1.優(yōu)勢:高靈敏、高專一性，抗原無須事先純化。

2.劣勢:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

四、竟爭法:

樣本里的抗原(自由抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起竟爭相同的抗體，當樣品里的自由抗原越多，就可以結合越多的抗體，而固定抗原就只能結合到較少的抗體，反之亦然，經(jīng)清洗步騾，洗去自由抗原和抗體的復合物，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只有固定抗原的對照組結果相比較，根據(jù)呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量。

1.優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本，而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

2.劣勢:整體的敏感性和專一性都較差。

五、新ELISA試劑盒技術:

基于細胞法是一種新的定性蛋白檢測技術，將細胞直接在微孔板里培養(yǎng)，待檢測時，不需抽提蛋白和裂解細胞，便可直接測量微孔板里蛋白經(jīng)刺激或抑制作用后的變化。

1.優(yōu)勢:無需裂解細胞，所以目標蛋白損失少，可測定完整細胞、黏附細胞、還有非粘附細胞。

2.劣勢:不能測定抗原量。