ELISA試劑盒的放大系統(tǒng)

    生物素與抗生物素之間具有*的親和力，可以縮短反應時間，達到快速檢測的目的。另外，抗體和酶的生物素標記率高，又不影響其活性，每個親和素分子能結合4個生物素，每個生物素能標記大量酶分子，使得ELISA的敏感性大大提高，生物素與親和素的結合也極為穩(wěn)定，ELISA試劑盒不會在洗滌過程中脫落。BA-ELISA是在常規(guī)ELISA的基礎上，結全生物素（Biotin）與親和素（Avidin）的高度放大作用，形成的一種檢測方法。BA-ELISA分為:

1，LAB法即酶聯(lián)親和素-生物素標記法（Labeledavidin-biotin，簡稱LAB）。用辣根過氧化物酶直接標記親和素，用生物素標記第二抗體。

2，ABC法即酶聯(lián)親和素-生物素-過氧化物酶復合物法（Avidin-Biotin-PeroxidaseComplex，簡稱ABC）。如用鏈霉親和素（Streptavidin），則形成鏈霉親和素-酶聯(lián)生物素復合物（Streptavidin-Biotin-PeroxidaesComplex，簡稱SABC）。在ABC法中，用生物素標記第二抗體，ELISA試劑盒又用生物素標記過氧化物酶。在使用前30min，親和素與酶聯(lián)生物素以1:1的比例混勻。1個親和素分子結合3個生物素分子，親和素剩下的1個結合點與標記第二抗體的生物素結合，親和素起橋聯(lián)作用。ABC法比PAP（Peroxidase-antiperoxidasetech-nique）法敏感幾十倍。

3，BAB法即酶聯(lián)親和素-生物素橋法（Bridgedavidin-biotin，簡稱BAB）。用游離親和素（或鏈霉親和素）作為橋聯(lián)劑，將生物素標記后開成的復合物與酶標記生物素連結起來，然后進行樣品的檢測。由于標記抗體分子上連有多個生物素，因此，ELISA試劑盒zui終形成的抗原-生物素標記抗體-親和素-酶標生物素復合物可積聚大量的酶分子；加入相應底物后，產生強烈的酶促反應，大幅度提高檢測的靈敏度。